qPCR内参Ct值

模板cDNA稀释的比较多所以内参的ct值比较大，然后目的基因的表达丰度比较高，所以ct值比内参小

如果内参基因的Ct值跑到了目的基因后面，可能存在以下几种情况：

样品中的内参基因表达量过高：内参基因表达量过高可能会导致其Ct值跑到目的基因后面。如果内参基因表达量太高，可能会饱和荧光探针或者引物，导致其Ct值增加。建议您重新评估内参基因的选择，并检查其表达量是否适合您的实验。

反应混合不均匀：反应混合不均匀也可能导致内参基因的Ct值偏高。如果反应混合不均匀，可能会导致某些引物或探针的浓度不均匀分布，从而影响PCR反应。建议您在反应前充分混合反应体系，并进行更严格的控制。

RNA提取和转录反应的质量问题：RNA提取和转录反应的质量问题可能会导致内参基因的Ct值偏高。如果RNA提取和转录反应的质量不佳，可能会影响内参基因的表达量和PCR反应效率。建议您重新评估RNA提取和转录反应的质量，并尝试使用新的RNA样品进行实验。

cDNA合成反应的问题：如果cDNA合成反应的质量不佳，可能会导致内参基因的Ct值偏高。建议您检查cDNA合成反应的条件是否合适，并尝试重新合成cDNA。

需要注意的是，内参基因的Ct值偏高并不一定表示内参基因的表达量高，也可能是由于其他因素导致。

你把cDNA稀释10倍，100倍再做下看看，考虑是c DNA稀释不足