大肠杆菌逆转录可以使用oligoDT吗，我的表达基因上有连续的a，能否使用oligoDT，然后做qpcr

可以做的，能p出来，只要有一点表达都能p出来

您的表达基因上有连续的A，说明您可能是在大肠杆菌中表达了一个带有poly(A)尾的外源基因。在这种情况下，您可以尝试使用oligo(dT)引物进行逆转录。

使用oligo(dT)引物进行逆转录的步骤如下：

RNA提取：从转化后的大肠杆菌细胞中提取总RNA，可以使用RNA提取试剂盒或经典的酚氯仿提取法。

RNA纯化：为了消除RNA中可能存在的DNA污染，请使用DNase I对RNA样品进行处理。

RNA定量：使用NanoDrop或类似设备对纯化后的RNA进行定量，并评估其纯度和完整性。

逆转录反应：使用oligo(dT)引物和逆转录酶（如M-MLV、SuperScript III等）按照厂商建议的方案进行逆转录反应。在逆转录反应中，oligo(dT)将结合到mRNA的poly(A)尾，并作为反应的起始位点。

qPCR：逆转录反应完成后，将产物用于qPCR实验。设计特异性引物靶向您的目标基因，然后使用合适的qPCR试剂盒和实时PCR仪器进行qPCR。

请注意，虽然可以尝试使用oligo(dT)引物进行逆转录，但是原核生物的mRNA不稳定性可能导致结果偏低。您可以考虑使用针对您目标基因特异性的随机引物，以便更准确地评估目标基因的表达水平。

大肠杆菌逆转录可以使用oligoD的，表达基因上有连续的a使用oligoDT可能会降低成功率，但是也可以用然后做qpcr。