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RNA反转录之后的cDNA跑胶该选择多大的marker?

相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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dxy_ud0dpda4


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3 个回答

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loveliufudan

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一般而言,可以根据已知目标基因的长度来选择 Marker 的大小。如果你希望检测的目标 DNA 片段在 100bp-1000bp 左右,则建议选择 100bp DNA ladder 或者 1kb DNA ladder 作为 Marker。如果你希望检测的目标 DNA 片段比较小,则可以选择 50bp DNA ladder 作为 Marker。因此,选择合适大小的 Marker,能够更好地检测出期望大小的目标 DNA 片段。

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dxy_ud0dpda4user-title

我理解的cNDA(反转录得到,未进行其他操作)是一条完整的单链,比如是“123456789”,那么我进行跑胶不也应该是“123456789”一起,只显示一个条带,无论选什么marker,无非是要比“123456789”要大,这样才能根据marker的标识知道cDNA有多大。但我理解你说的意思,是cNDA是由“1”、“2”...“9”按序组合,因为选择的marker不同,可以显示出“1”、“2”...“9”9个条带并能根据marker知道这9个条带的大小,是这么理解么。

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土井挞克树

有帮助

marker用2000的取6ul左右胶板的制作(Marker标记染色体上一个可以被识别的区域,我们用的是2000的(保存在4℃冰箱中):3-6ul单格加入。)

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汤姆卜丽波

有帮助

一般的cDNA跑电泳,取cDNA 1ul加loading buffer混匀,marker用2000就可以

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