外周血PBMC提取RNA的技巧(怎么保证提取过程中RNA不被降解)

减少污染和高温，可以加入稳定剂。

提取PBMC的RNA需要注意一些技巧，以确保RNA不被降解：

保持样品新鲜： PBMC非常容易受到外界环境的影响，如氧气、温度和振动等，这些因素都可能导致RNA降解。因此，需要在提取PBMC的过程中尽量保持样品新鲜。

使用RNA保护剂：可以在提取PBMC的过程中添加RNAlater等RNA保护剂，使RNA在提取过程中不会被降解。注意，在加入RNAlater之前应该先将PBS洗涤干净，否则会稀释样品。

快速提取RNA： PBMC在离体后RNA易被核酸酶降解，因此需要尽快提取RNA。在提取RNA的过程中，应该尽量避免长时间的暴露在室温下，可以在4°C下进行处理。RNA提取的过程中应该严格按照相关操作规程进行，保证RNA提取的纯度和完整性。

RNase避免污染： PBMC在提取RNA的过程中需要避免RNase的污染。可以在操作前先用70%的乙醇消毒所有实验仪器和操作台面，并且穿戴好手套，使用RNase-free的试剂和设备。

存储RNA： PBMC的RNA在提取之后应该尽快存储在-80°C的冰箱中，避免重复冻融，以保证RNA的完整性和稳定性。

首先是戴好口罩，减少交流，然后是减少走动和通风，尽量在冰上操作

1）尽量采用新鲜样本，并尽快在低温冻存或保存液中保存；2)裂解充分，使细胞充分释放RNA；3）裂解液中可加入β-巯基乙醇来让RNase抑制效果更好的发挥；4）选择合适的RNA纯化方式和高质量商品化试剂盒。