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同一条基因,一样的引物、模板、酶,在同一台pcr仪跑,但是结果如图,之前跑的比较好,今天跑的就很差强人意。

相关实验:长片段PCR实验

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dxy_efuv5i55

第二张图,因为看胶的时候在胶底下垫了透明手套,所以有气泡的轮廓


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4 个回答

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weiran0928

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第二天跑的胶图下方引物二聚体明显增多,可能是引物出现了污染或降解,建议更换新的引物,可以用送的引物干粉,加入一定量dd H2O重悬即可,引物管上有说明的。

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土井挞克树

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把样品量加大,有时候机器损耗的样品会多一些

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huarenqiang5

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主要考虑是操作上面的问题导致,如上样等。

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loveliufudan

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可能是以下原因导致PCR结果不稳定:

模板DNA质量不一致:PCR的成功与否和模板DNA的质量密切相关。如果您使用的模板DNA质量不一致,可能会导致PCR结果不稳定。建议您检查模板DNA的质量和纯度,并根据需要重新提取或纯化。

PCR反应体系中的成分不均匀:如果PCR反应体系中的成分不均匀,可能会导致PCR结果不稳定。建议您仔细混合PCR反应体系中的所有成分,并在每次添加试剂后彻底混合。

PCR反应体系中的酶的质量不一致:如果PCR反应体系中的酶质量不一致,可能会导致PCR结果不稳定。建议您检查PCR反应体系中使用的酶的质量,并根据需要更换。

PCR反应条件不稳定:如果PCR反应条件不稳定,可能会导致PCR结果不稳定。建议您检查PCR反应条件,包括温度、时间和PCR循环次数,并根据需要进行优化。

实验环境或实验操作不一致:实验环境或实验操作的不一致可能会对PCR结果产生影响。建议您在每次实验前准备好所有的试剂和设备,并保持实验环境和实验操作的一致性。

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