qPCR阴性曲线为什么这样

可能的原因是：污染；引物二聚体。最好电泳确认下。如果是探针法，可能的原因基本上是污染。如果是引物二聚体，那么适当调低引物的加量，如果始终有引物二聚体峰，而且认为有影响的话，那么只能更换引物。如果是污染，那么要注意以下方面的操作。模板添加区和混合液配制区最好分开。做PCR时，在混合液配制区直接把阴性的管子盖给盖上，然后将分装好的各个管子拿到模板添加区，按照低浓度到高浓度的顺序添加。加模板时，每次都要换枪头。但是，如果是大肠杆菌等空气广泛存在的菌体，污染是很难完全避免的。

你这扩增曲线起始部位不光滑，应该是污染了

你拿什么做的阴性曲线，感觉是被污染了，所以会起峰，但是因为浓度不够，所以起峰很晚

基线设置的不合适，范围过大了，调整一下范围。