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反向 PCR （inverse-PCR）
最新修订时间：
简介
利用反向PCR可对未知序列扩增后进行分析，探索邻接已知DNA片段的序列，并可将仅知部分序列的全长cDNA进行分子克隆，建立全长的DNA探针。可用于：（1）基因游走研究；（2）转位因子研究；（3）已知序列DNA旁侧病毒整合位点分析等研究。
来源：丁香实验
操作方法
1、基于已知 DNA 序列，设计并合成寡聚核苷酸引物 1 和引物 2。2、用合适的限制性内切核酸酶（见以下注释）消化 2~5 μg DNA 模板（序列 10 bp）。用酚：氯仿提取消化后的 DNA，再用氯仿单独抽提。加 0.1 倍体积的 3 mol/L 乙酸钠和 2.5 倍体积的乙醇使 DNA 沉淀，离心回收沉淀，用 TE 缓冲液（pH8.0）溶解使浓度为 100 mg/mL。【选做步骤，DNA
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