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qpcr之前必须先做琼脂糖电泳吗?

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娜娜默默

qpcr之前必须先做琼脂糖电泳吗?还是可以直接做pcr呀

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7 个回答

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dxy_y9nrs2t6

有帮助

qpcr的电泳有两个目的:

1、是验证引物扩增效果,不过这个在qpcr实验之前,引物到了就可以安排预实验了;

2、验证rna的完整性,超微量紫外分光光度计只能检测浓度和纯度,对于rna是否降解是无从得知的,需要通过电泳条带来判断

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bamboopiggy

有帮助

可以直接做啊,你想做电泳是想看rna的质量好坏吗?那个一般通过260/280,260/230就可以看出来

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曙光karry

有帮助

可以直接做,PCR一般采用三步法,qpcr一般采用两步法,模板DNA可以跑个胶看看浓度以及是否降解

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土井挞克树

有帮助

qpcr之前必须先做琼脂糖电泳,排除二聚体,要不然qpcr不易成功。

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诸葛靓LR1

有帮助

还是建议先做一下,做了结果更精确

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balalaLy

有帮助

不需要做的,有些人是为了不浪费qpcr的试剂才先跑电泳看一下。

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whilt-shirt

有帮助

可以先上PCR,然后再跑琼脂糖看一下引物特异性,最后再上qPCR

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