请教下，PCR条带总不在同一条线上，通常什么原因?

1.有可能是胶配置的不均匀，电泳液的浓度以及电压的时间不合适这类操作问题。

2.目标片段是否是一样大？模板的纯化程度不高？

3.有没有可能你的核酸降解了呀（猜的）

总之，换新鲜的电泳液，合适浓度的胶，电压可以适当调低一些，用新鲜的模板，祝你实验成功呀~

跑胶上样量太高了，或者胶不均匀导致的

条带不在一条线上原因可能是：琼脂糖凝胶凝固不均匀、目的条带浓度差异较大。

电压是不是高了，电泳过程太快，一般如果DNA浓度不小的话可以把电泳电压降低一点，不要超过110V，跑出来就好看，成一条线。

有以下几种情况：1.所提样品DNA的浓度不一样；2.胶没有弄好；3.跑电泳时候电压不稳定。