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荧光PCR扩增曲线问题?

相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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心细北方

同事在做PCR时,为什么有溶解曲线,确没有扩增曲线?大概什么原因造成的呢!

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5 个回答

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bamboopiggy

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没有扩增曲线可能是你的目的基因含量太低,所以没有扩增曲线

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huarenqiang5

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是不是把扩增曲线里的阴性对照或空白对照和熔解曲线里的实验组看混了。

是不是qPCR仪里检测扩增曲线和检测熔解曲线用了不同的探头,如果是的话就可以再做一次实验验证一下。

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明査日月

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  • 反应循环数不够,一般循环数设置为40。
  • 程序中未设置信号采集步骤。
  • 引物降解。
  • 模板浓度太低。
  • 模板降解。
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juyue2010

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程序设置问题,可能在扩增阶段没有设置拍照收集荧光

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

扩增有问题考虑还是pcr失败了。

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