7 个回答
genecreate
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可以，片段大难度大一些！！！！
滴水藏海69
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合适，没有问题的，连t载后再拿t载扩增
verbalkint
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Gateway或者Gibson重组法都可以在没有酶切位点的情况下把片段连进载体
dxy_n4jex0k8
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t载体的原理是ta克隆，即使用taq酶做pcr时3'链结尾会带polya，然后与t载体切口处的t互补配对。一般买的试剂盒已经做好了，载量最大多少bp去说明书看看吧，可能5000bp以内吧。
连接t载体时没有用到上面的酶切位点，这种属于入门克隆，差不多的还有拓扑异构克隆。除非你后期想把序列从载体上切下来，不然两端不用加酶切位点。
unquiet
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片段不是平末端，应该没有问题。
土井挞克树
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可以用重组质粒转，成功率相对大一些。
juyue2010
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可以尝试用重组法，插入到载体中
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