miRNA的逆转录内参在10左右，目的miR测不出来，怎么搞
dxy_mm4qo4mr
我用的诺唯赞的逆转录和sybr green qpcr试剂盒，引物用的锐博的茎环引物。
请问逆转录的时候是u6的引物和miR的引物一起放吗？（放在同一管里逆转录）
逆转录时RNA的量我用的450ng，跑qPCR的时候，一个稀释2倍，另一个并没有稀释，是因为量太少了吗？
而且锐博等我引物可以用其他的逆转录试剂盒嘛？我看锐博引物的那个说明书和诺唯赞的说明书不一样，里面含有的试剂都不一样，跑的条件更不一样，现在我该怎么办呢
求求各位大佬可以看看我，帮孩子一把吧
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4 个回答
dxy_rt9z23i7
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我也用的诺唯赞的这两个试剂盒，逆转引物用的诺唯赞他们的软件设计的。内参和目的miRNA的引物要分开两个管子逆转，不然的话会有误差。本来基因组里内参的表达量和你的目的miRNA的表达量是不一样的，内参逆转产物之后点Qpcr的时候是要稀释的，目的miRNA的表达量一般都比较低，不用稀释，我自己是这么做的，能做出来。
huarenqiang5
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引物和逆转录试剂盒建议用同一生物公司的，不是同一公司的肯定有影响
土井挞克树
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理论上可以一起放，你分着放没意义。
秋秋欣欣
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不是，逆转录只需要放mi的逆转录的引物就可以了
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