qpcr测蛋白Tm值

测蛋白Tm值？学习了。加样有没问题，程序因该和普通qpcr一样是相对固定的吧，另外这个机器需要用ROX矫正么，应该一一排除。

溶解曲线的程序一般机器默认，其他程序一般是根据试剂说明书设置

按照你用的supermix的说明书，来设置melt cuve的程序，然后看你用的染料，你的机器上有激发的通道没有，如果没有，就要换染料。但是一般都是会有的。

Tm值的计算方法：引物为20 mer以下时： Tm = 2℃×(A+T) + 4℃×(G+C) 引物为20 mer以上时：Tm = 81.5 + 0.41×(GC%) - 600/L 其中L为引物的长度。 在PCR反应过程中选择Annealing温度时，一般为 (Tm - 5)℃。