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关于高GC模板(>65%)PCR扩增

相关实验:逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR,rtpcr)

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dxy_f2999729

目前有一个65%-75%的放线菌基因组要PCR扩增验证,询问有没有推荐的PCR酶和反应体系。

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3 个回答

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Eason老歌迷

有帮助

PCRx Enhancer Solution有助于扩增GC丰富序列,可以提高引物结合的特异性和Taq酶的热稳定性,并且便于镁离子浓度和退火温度的优化选择。我之前扩增一段GC比70%的序列,可能还有二级结构,用了多个厂家的DNA聚合酶均扩不出条带,改用Platinum Taq DNA聚合酶后,当PCRx Enhancer Solution添加到浓度为3×时得到了很漂亮的结果。

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汤姆卜丽波

有帮助

可以通过降落pcr.或者是加Dmso,你也可以看看几个大的供应商有专业的酶

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bamboopiggy

有帮助

你可以查一下,好像是phusion专门有个配套的高GC 的buffe,你可以试试。

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