PCR体系中的Mg2+有什么作用？

Taq DNA聚合酶进行热激活。

因为镁离子是TapDNA酶不可或缺的辅助因子，镁离子对于稳定核苷酸和稳定扩增体系，提高tapDNA聚合酶的活性十分重要。镁离子浓度过低使酶活力降低，过高使酶催化非特异性扩增。

Mg2+ 是Taq DNA聚合酶活性所必需的,Mg2+ 浓度除影响酶活性与忠实性外,也影响引物的退火, 模板与PCR产物的解链温度,产物的特异性引物二聚体的形成等。Mg2+ 浓度过低时,酶活力明显降低;过高时,酶可催化非特异性扩增。PCR中Mg2+ 浓度在0.5～2.5mmol/L之间。如果溶液中存在EDTA,或在引物贮备液中有其他螯合物或者DNA模板,会干扰Mg2+ 的浓度。因此,要适当调整Mg2+ 的用量。

Mg2+ 是Taq DNA 聚合酶活性所必需的,Mg2+ 浓度除影响酶活性与忠实性外,也影响引物的退火, 模板与PCR产物的解链温度,产物的特异性引物二聚体的形成等。 Mg2+ 浓度过低时,酶活力明显降低;过高时,酶可催化非特异性扩增。

PCR反应体系中Mg2+的作用是促进Taq DNA聚合酶活性,引物在模板DNA是结合的位。

浓度过高可降低PCR扩增的特异性,浓度过低则影响PCR扩增产量甚至使PCR扩增失败而不出扩增条带