天一湖医者
原因:反应循环数不够 一般都要在35个循环以上,可根据实验情况增加循环(如至45循环), 但高于45个循环会增加过多的背景信号
检测荧光信号的步骤有误
一般SG法采用72℃延伸时采集,Taqman法则一般在退火结束时或延伸结束采集信号
引物或探针降解
可通过PAGE电泳检测其完整性
模板量不足
对未知浓度的样品应从系列稀释样本的zui高浓度做起
模板降解
避免样品制备中杂质的引入及反复冻融的情况发生
目的基因在组织中不表达或者表达量低
尝试其它组织
balalaLy
就是表达低到测不出来或者引物不行没跑出来
Eason老歌迷
可能是你设置的反应循环数不够 ,一般都要在35个循环以上。或者是检测荧光信号的步骤有误。也可能是引物或探针降解。
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