丁香实验_LOGO
登录
提问
我要登录
|免费注册

PCR没有想要目的条带只有其他条带

相关实验:间接原位 PCR(原位杂交PCR)

user-title

lanlansi

PCR的时候发现p出来的条带是1000-1500bp的,可是理论上应该是2400bp左右,引物blast过特异性没问题,求问是pcr条件的问题还是本身DNA的问题啊

wx-share
分享

3 个回答

user-title

天一湖医者

有帮助


最常见是引物不特异,如果引物与模版其他地方结合,扩出来的指定不是你想要的大小;

其次考虑模版问题,如果模版本身有大规模重复(很长的重复或串联重复),扩出来的东西也可能会多一段或少一段。

然后考虑酶的活性,

user-title

bamboopiggy

有帮助

primer可以match上,那match上的两段之间的距离是2400bp吗?感觉还是引物的设计有问题,你的模板是DNA还是cDNA?以及你的extension time是不是有问题?

user-title

Eason老歌迷

有帮助

有可能是没有目标基因,导致PCR只有杂带。或者是PCR片段过长,无法得到目标产物。

提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序