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丁香通

PCR没有想要目的条带只有其他条带

相关实验:间接原位 PCR(原位杂交PCR)

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lanlansi

PCR的时候发现p出来的条带是1000-1500bp的,可是理论上应该是2400bp左右,引物blast过特异性没问题,求问是pcr条件的问题还是本身DNA的问题啊

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3 个回答

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天一湖医者

有帮助


最常见是引物不特异,如果引物与模版其他地方结合,扩出来的指定不是你想要的大小;

其次考虑模版问题,如果模版本身有大规模重复(很长的重复或串联重复),扩出来的东西也可能会多一段或少一段。

然后考虑酶的活性,

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bamboopiggy

有帮助

primer可以match上,那match上的两段之间的距离是2400bp吗?感觉还是引物的设计有问题,你的模板是DNA还是cDNA?以及你的extension time是不是有问题?

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Eason老歌迷

有帮助

有可能是没有目标基因,导致PCR只有杂带。或者是PCR片段过长,无法得到目标产物。

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