QT-PCR实验技术操作中的数据误差分析？

相关实验：实时荧光定量 PCR（realtime PCR）

user-title

dxy_03an271q

2022-06-24

某位研究生在研究A基因功能时，首先将A基因的过表达重组质粒转染HEK293细胞，然后利用QRT-PCR鉴定过表达效率，发现过表达组A基因的Ct值与内参的Ct值都在18左右，而对照组A基因Ct值在25左右，内参在19左右;之后其又将这个质粒转染于HT22细胞中，同样利用QRT-PCR检测过表达，却发现过表达组A基因的Ct值在19左右，而内参的Ct值为40，对照组的A基因及内参的Ct值也都在41左右，请分析其原因?

4 个回答

user-title

Eason老歌迷

2022-06-27

有帮助

个人感觉，是不是你的pcr操作的问题

user-title

秋秋欣欣

2022-06-27

有帮助

在每个细胞中提RNA逆转录的时候都把浓度调一致

user-title

天一湖医者

2022-06-25

有帮助

不是因为内参在不同组织里表达是有差异的，而是你的加样量有差异，你能确定两组实验加进去的样本DNA含量一模一样么？退一万步讲，即便是肿瘤和癌旁的内参CT不同也不会影响最后的定量。原因的话，你再研究一下相对定量的资料。

user-title

bamboopiggy

2022-06-25

有帮助

只能说明在HT22细胞中，选的内参基因不能用，换一个试试

相关产品推荐

荧光定量PCR（qRT-PCR）| 实时荧光定量PCR实验代测| 荧光定量PCR实验（realtime PCR）服务

荧光定量PCR（qRT-PCR）| 实时荧光定量PCR实验代测| 荧光定量PCR实验（realtime PCR）服务

询价

抗体染料法定量PCR预混液（低ROX），阿拉丁

抗体染料法定量PCR预混液（低ROX），阿拉丁

￥659.90

UltraSYBR一步法荧光定量PCR试剂盒，阿拉丁

UltraSYBR一步法荧光定量PCR试剂盒，阿拉丁

￥1797.90

CFX96Deepwell Dx实时荧光定量PCR系统

CFX96Deepwell Dx实时荧光定量PCR系统

询价

SYBR Green I染料，用于实时PCR，阿拉丁

SYBR Green I染料，用于实时PCR，阿拉丁

￥3513.90

相关问答

问

qPCR实验内参基因CT值问题？

9 回答 14784 围观

问

求助，内参基因(gapdh)CT值在15-18，目的基因的CT值比内参基因小大概14-16，这个引物还能用吗，还是怎么处理解决

8 回答 10934 围观

问

对照组的bar值怎么做？

4 回答 7600 围观

相关方法

实时荧光定量PCR技术

2024-05-13

🔥 Real-time PCR（基本方法一）

2023-05-25

Real-time PCR（基本方法二）

2023-02-24

推荐阅读

PCR实验技术指南

PCR实验技术总结

丁香实验推荐阅读

视频播放按钮

如何分析实时 PCR 数据？

提问

扫一扫

丁香实验小程序二维码

实验小助手

丁香实验公众号二维码

扫码领资料

反馈

TOP

打开小程序