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链霉菌做荧光定量 PCR能不能以基因组做模板?

相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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Lee1D7B

  1. 用反转录的cDNA作为模板进行普通PCR扩增,发现引物扩增后条带很杂
  2. 以cDNA作为模板的荧光定量PCR结果显示很多基因没有
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6 个回答

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汤姆卜丽波

有帮助

可以做模板,这个问题应该是引物特异性不高才会出现

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Eason老歌迷

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定量PCR的模版既可以使总DNA,也可以是cDNA,但两种做法的用途不同。如果用总DNA做模版,你检测的就是总DNA的拷贝数。如果以cDNA为模版,你检测的就是某个基因的表达水平。

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bamboopiggy

有帮助

realtime pcr的引物是需要跨内含子设计的,你直接以genomic dna为模板是无法扩增出来的,建议更换一下引物

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月下扣动板机

有帮助

可以的,你做的是DNA的定量,这样做没有问题。你用质粒作为标准品做标准曲线,最后可以换算出来拷贝数,这是绝对定量。

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秋秋欣欣

有帮助

可以的,你做的是DNA的定量就行

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天一湖医者

有帮助

不可以的,链霉菌做荧光定量 PCR不能以基因组做模板。

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