实时定量PCR的一个小问题？

SYBR GreenⅠ较另EvaGreen的标准曲线误差较大，且样品间分散度也较大。在定量PCR中饱和染料EvaGreen的定量效果好于SYBR GreenⅠ。

1.EvaGreen对PCR的抑制性远小于SYBR Green I，因此，使用EvaGreen进行的qPCR实验可以使用快速PCR步骤。

2.EvaGreen在实验中可以使用较高的浓度，从而获得远强于SYBR Green I扩增信号;较高浓度的EvaGreen也消除了“染料重分布”的缺陷，使EvaGreen既可用于多重PCR，也可用于高分辨率（高清晰）熔解曲线分析（ HRM ）;该分析正被越来越多的用于PCR后的基因分型和异源双链分析。由于SYBR Green I 对PCR的抑制性，从而要求其使用浓度必须很低，因此SYBR Green I无法解决由低浓度造成的染料重分布问题，既不能用于多重PCR也不能用于HRM。同时，染料重分布问题也可能影响常规熔解曲线的可靠性，因为低熔点的DNA链可能由于这种原因而无法检测到。

3.EvaGreen 的稳定性极好。在正常的储存、操作和PCR过程中不会被破坏。在缓冲溶液中的染料可以安全的储存在室温或冰箱里，也可以反复冻融。与之相反，SYBR Green I不稳定而且降解后对PCR抑制性更强。

evagreen属于饱和染料，说是效果比sybr好，不过用的人并不是很普遍

EvaGreen与SYBR Green I两种染法的区别如下