李小栋UI65
引物效果不好
可能是由于引物间存在互补序列
天一湖医者
.1引物设计和样品使用均是一样的情况,就是反应条件的问题
二.反应条件就看你的实验操作和所使用的仪器,操作都一样的话,仪器设定上出问题的可能性会大一些,其中退货温度是比较关键的.
汤姆卜丽波
引物浓度过高,模板浓度不合适,引物,模板不匹配都有可能。可以试着加DMSO去除引物二聚体看一下。
bamboopiggy
你设计的引物有问题,可能与模板的结合率还不如他们之间的相互作用。或者你提高一下annealing temperature试试