RT－pcr，跑出来是一条直线是什么原因？

一条线说明未起峰，未检测到目的基因。

检查模板制备、引物、体系是否有问题。

起始模板浓度过高的话荧光PCR不会有太好的结果，建议直接使用cDNA作为模板，可以做个稀释100倍，甚至更高后再做！

那很有可能是引物二聚体。出现这个情况，可能的原因有:你用的引物不对，不是目的DNA扩增需要的引物。DNA回收提纯的问题。PCR体系内镁离子浓度问题。

内参的引物浓度是否过低，或者是引物与模板结合力比较弱引起。

目的基因不存在、不表达或者引物不合适

1.反应体系里面有什么忘记加了，2机器坏了 3，模板dna可能有问题。