bamboopiggy
实验严谨的,是要跑胶看一下rna的完整性。方法和跑DNA差不多,只是配胶的液体中要加入DEPC,防止RNA降解。
汤姆卜丽波
有着杂志会要求跑一下,看RNA有无降解,
保险的话还是跑一次,如果杂志要求了。
步骤如下:
将制胶用具用70%乙醇冲冼一遍,晾干备用。
配制琼脂糖凝胶。
①称取0.5g琼脂糖,置干净的100ml 锥形瓶中,加入40ml蒸馏水,微波炉内加热使琼脂糖彻底溶化均匀。
②待胶凉至60--70 ℃,依次向其中加入9ml甲醛、5ml 10X MOPS缓冲液和0.5μ|溴化乙锭,混合均匀。
③灌制琼脂糖凝胶。
样品准备:
① 取DEPC处理过的500μ|小离心管,依次加入如下试剂: 10x MOPS缓冲液2ul,甲醛3.5μ|,甲酰胺(去离子)10μ|,RNA 样品4.5μ|,混匀。
② 将离心管置于60℃水浴中保10分钟,再置冰上2分钟。
③ 向管中加入3μ| 上样染料,混匀。
上样。
电泳:电泳槽内加入1XMOPS缓冲液,于7.5V/ml 的电压下电泳。
电泳结束后,在紫外灯下检查结果。
天一湖医者
是的,一般提取出的RNA在逆转录之前需要跑胶验证。
Eason老歌迷
不是说杂志必须要求,是你要验证你提没提出来。具体可以查看文献,和dna差不多
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