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PCR实验过程中模板处理方法不完善怎么办

相关实验:重叠延伸 PCR

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丁香粉猪猪

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5 个回答

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秋秋欣欣

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PCR实验模板先从提RNA开始,然后逆转录得到模板cDNA,进行一定的稀释就可以用于PCR

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whilt-shirt

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重新提取核酸,然后再跑一遍试试

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bamboopiggy

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可以再处理一次,dna模板还是比较抗造的。

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Eason老歌迷

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如果这次实验模板处理不是特别好的话,那你下次就要注意点,然后看看实验结果吧,如果不行就要重新跑了。模板提取不完整,其中不含你的目的基因,或目的基因含量太低。可以跑个电泳看看提取的DNA,PCR阳性样品与阴性样品是否有明显差别。如果确定是这种问题,可以增加模板量试试,但不一定行得通。模板里面残留某种试剂成份,可能抑制Taq聚合酶的活性,如果是这种情况,可以用试剂盒把模板再纯化一下,或将模板做个梯度稀释以确定最佳的模板量

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未来9

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PCR 扩增技术的原理虽然非常简单, 但这一技术的合理应用是极其复杂的, 如对 PCR 主要 成分之一 DNA 聚合酶的影响因素很多,这些因子是怎样作用于聚合酶,其作用机制至今仍不清楚,因此样本处理不妥当可能会抑制扩增或者导致非特异性扩增。

一般分泌物样本,去脱落细胞为主,避免采集过多的脓性分泌物;痰液样本一定要充分液化。

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