pcr扩增中用到的DNA聚合酶有哪几种，怎么选择用哪种？预混的好，还是自配的好

DNA聚合酶有很多种类型，包括Pfu系列、Vent系列、KOD系列，Taq 系列、Tth、T7和ϕ29等等

最常见的当然是Taq DNA聚合酶，也是历史最悠久的，野生型的Taq虽然已经退出实验舞台，随着各种突变体的出现，Taq也还健在。Taq具有5’-3’端的聚合酶活性，5’-3’端的外切核酸酶活性，它没有3’-5’端的校正活性。Taq最大的特点是良好的耐热性，能够承受PCR的热变性步骤，使得中途不需要再添加酶。但是，由于Taq没有校对活性，因此其保真性较低。它的保真性主要靠镁离子和dNTPs的浓度和比例来实现。

A.Klenow片段：为DNA聚合酶Ⅰ的片段，有聚合酶活性和3’~5’外切酶活性（最适37℃）；

B.Taq酶：耐热DNA聚合酶，可耐受93～95摄氏度（最适74-75℃），是PCR普及的关键。它避免了不断补加DNA聚合酶的繁琐操作，提高了退火和延伸的温度，减少了非特异性产物和DNA二级结构对PCR的干扰，提高了PCR的特异性、敏感度和产量。它没有3’~5’外切酶活性，无校对功能，点突变较多。依赖镁离子。

C.Stoffel片段：第二代耐热DNA聚合酶，去除Taq酶的5’~3’外切酶活性，将97.5摄氏度的半衰期提高到20min，而Taq酶只有5min；对复合PCR（2个或以上模板位点的PCR）更有效；

D.VentTMDNA多聚酶：耐受100摄氏度以上高温达2h；具有校对功能（3’~5’外切酶活性）。

E.RTth 逆转录酶：有依赖于RNA的耐热DNA聚合酶活性和依赖于DNA的耐热DNA聚合酶活性，这两种活性分别依赖于锰离子和镁离子。

有做普通pcr的rTaq酶，也有做克隆的，高保真的LA taq酶等等好多，主要看你的实验目的是做genotyping还是做克隆，如果做克隆，根据你片段的长短，也可以选择不同的DNA聚合酶。至于要用预混的还是自配的，也是看你的实验目的，预混的方便，自配的，可以加入一些提高克隆效率的Mg2+或者DMSO，这一切都是根据实验目的。

DNA聚合酶有很多种类型，包括Pfu系列、Vent系列、KOD系列，Taq 系列、Tth、T7和ϕ29等等。

最常见的当然是Taq DNA聚合酶，Tth DNA 聚合酶的耐热性比Taq 聚合酶高，适用于高GC含量的PCR反应。Pfu DNA聚合酶具有出色的热稳定性，具有5'→3'DNA聚合酶和 3'→5'外切酶活性，不具5'→3'外切酶活性。有特有的“校正作用”，Vent DNA 聚合酶：该酶具有5'→3'DNA 聚合酶活性，兼有 3'→5' 外切酶活性。3'→5' 外切酶活性的主要功能是校对作用。

• Taq酶（很低的5’—3’外切酶活性)
• Pfu酶（3’—5’外切酶活性，更保真但效率低）

这两类酶有经过优化，这两种酶还可以根据是否高保真，是否更耐热，是否要热启动进行细分

我们一般用预混的，每个品牌的分类都不太一样。一般检测用灵敏度高的，扩增用高保真的