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qPCR时,cDNA的浓度怎么控制在同一浓度范围?

相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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四月清风小兔

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4 个回答

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天一湖医者

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一般提取组织后测RNA的浓度,然后反转录的时候保证reaction mixture里面RNA的量是一样的。然后你反转录成了cDNA。这个时候不必要测浓度。因为你的反转录体系都是一样的,理论上讲(建议用multipipetide)你生成的cDNA也是一样的。

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汤姆卜丽波

有帮助

不需要特别控制浓度吧,其实做出来趋势是差不多的

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bamboopiggy

有帮助

用同样量的rna反转录为cDNA,默认反转效率是一样的,所以cDNA的浓度也默认是一样的。

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未来9

有帮助

将 cDNA 做梯度稀释,把得到的不同梯度 cDNA 同时进行 qPCR,选择位于 15-33 范围内的 CT 值对应的 cDNA 稀释梯度作为最佳稀释梯度。

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