RT-PCR结果中出现undetermined

是不是加样问题，惯性操作，加到那个孔样品不够了

undetermined 就是你孔里的模板量太低，没法detect到，可能你这个孔没有加模板，或者是模板混的不匀，加的少了。

undetermined表示未知，意思为在一定的阈值下， 没有出现Ct值。看你的log扩增曲线，目的基因好像没有扩增啊？另外问一下你设计的引物的Tm值是多少？溶解曲线70℃差不多接近产物的Tm值了。建议检查一下引物是否有非特异结合的情况。
你可以将你的结果先重分析一下，看看那些没有出现的孔，一般情况下这种是你的cDNA浓度低或者是这个引物的问题，看你上传的溶解曲线的那个图，建议你先检测一下你的引物是非特异性结合，再看一下你模板的浓度