多重PCR使用哪些软件可以评价和优化各条引物？

有很多在线的工具，也可以选择snapgene

普通的pcr引物设计的软件都可以用，只要使引物的退火温度接近，引物长度应最好 18~24 个碱基。退火温度和循环数非常关键。要尽可能提髙退火温度，要确认每一对 引物单独扩增时的退火温度，然后在多重 PCR 反应时采用最低的退火温度。同样，要采用最少的扩增数。

软件如“Vector NTI Suit”、 “Dnasis”、“Omiga”和“Dnastar”

可以使用使用软件Primer premier5.0、oligo6.0对设计的引物进行评价分析