以片段为模板扩增会导致产物品质降低吗

是会低一些，但是我们也有这样扩增过，还是能扩出来的

以片段为模板扩增可能会导致产物品质降低

肯定会啊!模板的浓度会直接影响扩增产物的再现性，特异性!

可能你overlap pcr的产物是不是就比较少啊？考虑一下扩大pcr的体积，pcr产物然后过柱后，再进行二次pcr。

以片段为模板扩增会导致产物品质降低。