为什么目的基因Ct值正常，反而内参的Ct值很高

生物是垃圾

2021-11-02

内参的Ct值都在30以上

杜小涛

2021-11-02

有帮助

引物反复冻融次数多了就有可能降解，不过你这个可以先考虑基因时空表达的问题，如果确定你做的这个时期和组织确定表达量并不低，就有可能是引物反复冻融导致的降解了

生物是垃圾

2021-11-02

有帮助

之前用过的都正常。引物也会降解吗，虽然配了很久但是一直都是置于－20度保存。

杜小涛

2021-11-02

有帮助

内参之前用过么？没有用过的话应该就是和引物扩增效率有关系，可以先尝试做引物扩增效率找最佳的退火和引物之间的搭配。如果之前用过，有可能就是引物降解了或者是你的内参基因在时空表达特异性上不稳定，在你取样的组织和时期，表达量本来就低。

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