PCR 产物是否可以直接连到相应的载体上？

赵栋2012

2013-02-28

我设计引物两端带有酶切为点，PCR 扩增的片段，通过这两个酶切为点酶切然后连接到相应酶切的载体上，调转化子后还是用这两个引物去 PCR 做鉴定不知道是不是可以呢？还有 PCR 产物是不是可以直接连到相应的载体上？

tao0129

2013-02-28

有帮助

1克隆产物应该用载体两端含有的引物进行鉴定。2. PCR产物是否可以直接连接到相应载体，要看你PCR用的什么酶。3.用Taq酶的产物末端自动加A，为黏性末端，可以直接连接；如果是用高保真酶，产物是平末端，必须进行磷酸化或者末端加A才能连接。