高保真酶怎么选择？

传统的高保真酶例如pyrobest没有什么可说的，保真性一般是普通Taq酶的10倍以内。但传统的高保真酶最大的缺点是扩增能力差，长一点儿的基因很难有效扩增，要摸很多条件，一个字麻烦。最近可以买到的高保真酶选择的机会多一点儿了，有宝生的primer star，还有人提示的Taq plus（这个酶没有详细了解过），上述这两个酶的扩增能力我没有详细了解过，有兴趣的可以去打听一下。最高保真的酶可能要数NEB的phusion了，比普通的taq酶保真性高50倍，扩增能力又超强，1k/15s，扩增长度为10k的序列不在话下（最长的我做过10k），更长的也应该可以。这个酶最大的缺点是贵，100u的酶1000元。所幸的是现在有替代这个酶的候选了，全式金的fast pfu能力与phusion相当，价格是400-500元250u（或者更少，没有记清楚），这个酶在我做定点突变的时候用过，测序显示4.2k序列几乎可以保证没有错误。