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Western与RT-PCR的区别?

相关实验:逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR,rtpcr)

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赵栋2012

我做的这个指标是个蛋白,有的文献做的是Western,有的做的是RT-PCR,我知道一个是测它蛋白的表达,一个是测它mRNA的表达,我就不清楚为什么都只做一种方法,我觉得两种都要做,做一种有意义吗?
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2 个回答

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小坏2012

有帮助
Western blot 检测的是蛋白水平,而RT-PCR检测的是mRNA,即基因水平的变化,一般来说,二者是平行关系,即基因水平的变化会引起蛋白水平相应的变化,但是从基因到蛋白也存在修饰等因素存在而出现基因水平升高而蛋白水平没有变化的情况,所以二者反应的是不同层次的变化。
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tao0129

有帮助
这只是从不同的角度来分析,Western研究的是蛋白表达水平,RT研究的是转录水平,尽管二者都是研究基因表达的。但有一定差别,转录水平不完全等同于蛋白表达,因为它没有考虑到转录后调节的问题。但RT有一个好处,只有有序列就可以做,不象Western必须有抗体。并且RT可以研究同一基因不同亚型的表达,而同一蛋白亚型通常有多种基因型。选择哪一种须根据你的目的而言,能两种都做当然好,但有时候也会出现不相一致的结果,就看你如何解释。
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