定量PCR的扩增曲线不平滑是为什么？

1，体系不稳定，加大体系，2，如果是国产试剂的话可能这种现象算正常的，因为每次循环完后读荧光时，国产的染料不一定每次都结合的到DNA上，因此即使扩增出片的，也可能因为染料无法结合到DNA导致荧光值上下波动。3，引物扩增效率不高，非特异性不强，4，延伸出问题，可以考虑72度延伸时间增长，

如果怀疑染料问题，你可以试试EVA GREEN饱和染料，要比SYBR GREEN精确很多，不过很贵哈，要是做一般的mRNA基因表达差异分析大可不必使用EVA GREEN

参比染料浓度太低