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琼脂凝胶电泳产生微笑条带怎么办?这是酶切电泳,第一列DNAmarker,第二列双酶切产物,第三列原质粒。电压120V21min。

相关实验:质粒构建技术

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dxy_9njnv24q


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7 个回答

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周末也要努力呀

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微笑条带是你的胶没匀,制备前涡旋混匀

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毛利小五郎的徒弟

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凝胶不均匀,条带出微笑。所以要保证凝胶均匀

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huarenqiang5

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考虑以下几点原因,然后针对性处理:

1.上样量太大。

2.含有其他杂质或样品降解。

3.灌胶的时候冷却不均匀,中间部分冷却不好,导致凝胶中的分子有不同的迁移率所致。

4.样品中盐浓度过高。

5.每孔点样量不均匀。

6.电泳电压不稳定或过高。



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高山云初

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最常见的原因是因为上样量太大了,常见的凝胶孔位的宽度是5mm,如果往里面加载的样品超过0.5ug的话,就表明过量了。

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粥辰辰辰辰

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原因一:核酸酶污染


解决方法:每次吸取时更换灭菌枪头,勿将电泳缓冲液带入管中;用后密闭4°C保存。

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此用户已注销

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最常见的原因是因为上样量太大了,常见的凝胶孔位的宽度是5mm,如果往里面加载的样品超过0.5ug的话,就表明过量了。

最后,电泳时就会出现条带两侧卷起弯曲(像微笑表情)、模糊不清、条带拖尾的现象。DNA片段越大,这种现象会越明显。

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sswei

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形成原因:主要是由凝胶中间部分凝固不均匀引起的,多出现于较厚的凝胶中。

处理办法:待其充分凝固再做实验。

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