做定点突变，第一步中，目标质粒扩增，扩增的是质粒中的目的片段还是质粒载体+目的片段

用点突变的序列引物做全长扩增，包括正反向，得到的是含点突变的质粒载体

后者，扩征的是质粒载体加目的片段，

在做定点突变的第一步中，我们需要对目标质粒进行扩增。扩增的是整个质粒，包括质粒载体和目的片段。通过PCR扩增，我们可以获得大量的质粒DNA。在后续步骤中，我们会引入定点突变，然后将突变的质粒进行转化、筛选和鉴定。