做定点突变，第一步中，目标质粒扩增，扩增的是质粒中的目的片段还是质粒载体+目的片段

balalaLy

2023-04-22

有帮助

用点突变的序列引物做全长扩增，包括正反向，得到的是含点突变的质粒载体

Dr_劉医生

2023-04-22

有帮助

后者，扩征的是质粒载体加目的片段，

loveliufudan

2023-04-21

有帮助

在做定点突变的第一步中，我们需要对目标质粒进行扩增。扩增的是整个质粒，包括质粒载体和目的片段。通过PCR扩增，我们可以获得大量的质粒DNA。在后续步骤中，我们会引入定点突变，然后将突变的质粒进行转化、筛选和鉴定。

飞不厌倦的鸟

2023-04-22

您好，目的质粒扩增完之后，进行DpnI消除原始模板后，应该就可以进行转化感受态了吧。我设计的引物里包含了突变位点，后期是否不用重组这个步骤。如果扩增的是一整个质粒的话，它还是个环状，而不是线状，应该也无法重组吧。期待得到您的指点。

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