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简介
DNA定点突变可用于:(1)研究蛋白质相互作用位点的结构、改造酶的不同活性或者动力学特性;(2)改造启动子或者DNA作用元件;(3)提高蛋白的抗原性或者是稳定性、活性、研究蛋白的晶体结构,以及药物研发、基因治疗等等方面。
来源:丁香实验
操作方法
一、引物设计 每条引物都要携带有所需的突变位点,引物一般长25~45 bp,设计的突变位点需位于引物中部。 二、反应 1. 使用高保真的pyrobest DNA聚合酶,循环次数少,一般为12个循环。 2. 反应体系: (1)10x pyrobest Buffer: 5 ul (2)dNTP Mixture(10 mM) :1 ul (3)模板DNA(5~50 ng) :1ul (
🔥 DNA 定点突变基因定点突变是指向目的 DNA 片段中插入、缺失或点突变一个或多个碱基以改变基因的序列,进而突变某个氨基酸。