急，急，急

有些质粒在大肠杆菌中的拷贝本来就很低，可以多收集菌体。这个载体是表达载体,拷贝数低于克隆载体,所以提质粒较少,可以多提取点,洗脱时候少加点洗脱液来提高浓度。质粒拷贝多少跟载体本身有关跟宿主菌关系不大。

可以把质粒重新转化的，可以通过将多个上清洗脱到一个柱子里提高浓度

有些质粒在大肠杆菌中的拷贝本来就很低，可以多收集菌体

试试直接中提质粒，保证菌种是正确的情况下，先接种到试管或者15毫升离心管，摇5-8小时之后把菌液接种到200-300毫升培养基，培养过夜后第二天中提质粒。