提问
提问
我要登录
|免费注册

急,急,急

相关实验:DNA 琼脂糖核酸电泳

user-title

dxy_fvid0ih7

请问各位大佬如何提高pbi121质粒浓度,尝试过重新转大肠杆菌,也用之前保的种直接摇菌都不行。不知道是什么原因导致的,希望各位大佬可以指点一下,感激。

wx-share
分享

4 个回答

user-title

Eason老歌迷

有帮助

有些质粒在大肠杆菌中的拷贝本来就很低,可以多收集菌体。这个载体是表达载体,拷贝数低于克隆载体,所以提质粒较少,可以多提取点,洗脱时候少加点洗脱液来提高浓度。质粒拷贝多少跟载体本身有关跟宿主菌关系不大。

user-title

府宅

有帮助

可以把质粒重新转化的,可以通过将多个上清洗脱到一个柱子里提高浓度

user-title

dxy_gwrp7ndq

有帮助

有些质粒在大肠杆菌中的拷贝本来就很低,可以多收集菌体

user-title

申东熙老伯

有帮助

试试直接中提质粒,保证菌种是正确的情况下,先接种到试管或者15毫升离心管,摇5-8小时之后把菌液接种到200-300毫升培养基,培养过夜后第二天中提质粒。

提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
关注公众号
反馈
TOP
打开小程序