病毒滴度的测定有哪些方法，什么原理

可以用稀释计数法，不同稀释比例的量去感染细胞然后镜下计数，在计算病毒滴度

病毒滴度的测定，主要有两个办法，一个是稀释计数法，一个是定量pcr法。

我们一般是使用病毒噬斑实验，病毒会在长满细胞的细胞板底上出现噬斑，一个噬斑即一个病毒。每次做六个滴度，第二天使用结晶紫染色数噬斑。

直接计数法：将病毒与乳胶颗粒混合电子显微镜观测，缺点是无法判断病毒的感染性。

间接计数法：空斑形成单位 plaque forming unitsPFUs 50终点法血凝试验干扰滴定

基本原理原理：空斑形成单位 plaque forming unitsPFUs 试验将不同稀释倍数的病毒与平铺于平板表面的宿主细胞混合当病毒感染时会造成宿主细胞溶解而形成空斑每个空斑系由一个病毒颗粒引起计数空斑数目再乘稀释倍数得病毒感染的浓度﹣病毒空斑一蚀斑将病毒稀释后移入单细胞培养瓶中吸附1h后覆盖营养琼脂病毒在琼脂中只感染临近的细胞形成空斑的退化细胞区中性红染色活细胞染红色死细胞无色产生 CPU 的病毒均可用此方法

稀释计数法

滴度单位：TU/mL，指每毫升中含有的具有生物活性的病毒颗粒数。「TU」为「transducing units」的缩写，中文为「转导单位」，表示可以感染并进入到靶细胞中的病毒基因组数。

定量 PCR 法