关于PLKO.1测序

游标卡尺OO59

2022-07-28

我的PLKO.1-shRNA测序结果失败无信号，但是我备注了发夹结构，有的有三百多个碱基，有的只有五个，之前跑胶验证是七千左右的条带

balalaLy

2022-07-30

有帮助

多挑几个菌落试试，我试过一个板反复测了几次，最后才测成功

bamboopiggy

2022-07-29

有帮助

PLKO质粒构建，插入的片段也就是50-60bp，测序能测出300多，足够了啊，如果正向测不出来，也可以反向测测试试。

游标卡尺OO59

2022-08-05

我的测序出来了，只有AgeI前面45个碱基匹配上了，到片段那里它就匹配不上了，然后测序结果一共有985个碱基，只有这45个匹配上了

Eason老歌迷

2022-07-29

有帮助

可能是因为发卡结构测序不通导致的。可以选择CTCGAG作为loop环，它本身就是酶切位点，再选择其他合适的一个位点进行酶切鉴定就能确认是否有插入了。一般不会插错或者有突变。

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