游标卡尺OO59
我的PLKO.1-shRNA测序结果失败无信号,但是我备注了发夹结构,有的有三百多个碱基,有的只有五个,之前跑胶验证是七千左右的条带
balalaLy
多挑几个菌落试试,我试过一个板反复测了几次,最后才测成功
bamboopiggy
PLKO质粒构建,插入的片段也就是50-60bp,测序能测出300多,足够了啊,如果正向测不出来,也可以反向测测试试。
游标卡尺OO59
我的测序出来了,只有AgeI前面45个碱基匹配上了,到片段那里它就匹配不上了,然后测序结果一共有985个碱基,只有这45个匹配上了
Eason老歌迷
可能是因为发卡结构测序不通导致的。可以选择CTCGAG作为loop环,它本身就是酶切位点,再选择其他合适的一个位点进行酶切鉴定就能确认是否有插入了。一般不会插错或者有突变。
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