小崔正在努力
我的目的片段时2900bp 程序设置如下
出来的结果是一条很亮但没有目的条带的弥散带(前三个是我的基因,基因不同但大小都在2900左右) 接下来我该如何调整才能P出目的条带呢
Eason老歌迷
你这是有点亮带拖尾。可能是你的引物设计不佳,也可能是PCR中DNA浓度加的太多,也可能是mg2+浓度加的太高。
bamboopiggy
你用的什么酶?最好说一下,一般是按照酶的说明书来调pcr的程序,annealing temperature 是根据primer 的low temperature 来决定,extension time是根据你的酶的扩增效率来决定时间长度的,但是一般extension temperatue 是72度。
whilt-shirt
可以试试降低引物浓度,增加循环数试试
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