一直长不出噬斑，有无懂行大佬了解此类情况

芋圆圆圆P32I

2022-07-10

使用T7噬菌体包装，使用美国Novagen试剂盒，图片中所使用的体系是顶琼3ml，300微升菌液和10微升重组噬菌体铺在LB培养基上。然后就出现这样的情况。之前试过5ml顶琼加1ml菌液和100微升梯度稀释过100倍和1000倍的重组噬菌体，只有一个长出了噬菌斑，其余均未生长出噬菌斑。有无大佬了解这类情况，已经耗了半个多月了，可否给新手小白提出一些建议🥹

1 个回答

Eason老歌迷

2022-07-11

有帮助

所用细菌是否正确？也就是是否是lamda噬菌体的宿主菌。NZY top是否够好？温度太高？浓度也就是营养不行？PH对么？培养时间是否足够长？培养温度是否合适？噬菌体活力是否够，也就是文库保存不当的话，噬菌体已经没活力了。测测，增大噬菌体的量再培养看看。培养的时候，适当将噬菌体和宿主菌先放37°孵育半小时，也许会好一点，增加粘附，侵入。