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磁珠法提取动物组织DNA,晾干时加热效果大吗?

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dxy_zgtod6u0

我们实验采用磁珠法提取动物组织样本。先对动物组织样本进行裂解,后续用磁珠法试剂盒提纯(自动化设备,移液法)。在晾干时,由于自动化设备采用的是移液法,所以磁珠晾干不彻底,目测有液体残留。后续建库效果不理想,不知道是不是因为乙醇残留。所以我们在晾干时,让设备同步增加了加热(60℃)加速乙醇挥发。但是目测磁珠结块,洗脱得率不如之前的结果。请问大家一般是怎么平衡这个问题的?或是对晾干步骤有比较好的建议吗?

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3 个回答

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Eason老歌迷

有帮助

磁珠粒径小,磁含量少;磁性弱,亲水性不够;解决方案:筛选、替换匹配的磁珠。

磁性分离器磁场弱,吸磁效果不理想;解决方案:选择高磁性分离设备,或增加磁吸时间。

由于裂解不完全,导致样本黏度过大;样品裂解后,释放蛋白、其他杂质将磁珠紧紧包裹,影响磁吸效果。

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bamboopiggy

有帮助

您可以适当延长晾干的时间,来增加乙醇的挥发,不建议加热到60,可能会对磁珠表面挂的东西造成损伤,从而降低得率

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未来9

有帮助

理论上是有效果的。DNA在加热时会被二苯胺染成蓝色。起到便于提取的作用。


原理:
1.析出溶解在NaC1溶液中的DNA。
2.用冷酒精提取出含杂质较少的DNA。
3.DNA在沸水浴时被二苯胺染成蓝色。

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