alirgnahs
迟C迟
琼脂糖凝胶电泳没必要在冰上进行,只要样品没问题,没降解没污染,一般条带也不会拖尾。
Keven轩
可以,但是一般没有这个必要,不然会很浪费冰的
Guoood
电泳时在冰上确实可以起到一定降温作用,但条带拖尾还可能与配的琼脂糖凝胶的好坏及电泳液PH有关,最好胶和电泳液都用新鲜配制的
bamboopiggy
是,如果电流过大,会产生大量的热,让胶溶解变形,从而使条带改变
天一湖医者
条带拖尾原因有以下:
1、 可以考虑是不是样品不纯,目的产物与杂带相差不大,所以要多跑一段时间才有尾巴。参考marker,marker应该不会有。如果有的话说明配胶有问题。
2 、琼脂糖检测DNA一般去1~5微升原液,加2微升溴酚蓝便可,注意上样浓度;
3、可能是原液浓度太大造成的;
4、可能DNA已降解。
5、在提取前对样品进行一定的脱腐处理呀。很简单。有一种TENP buffer,文献中查的到的。
6、 DNA降解避免核酸酶污染。
7、 DNA上样量过多,可以减少凝胶中DNA上样量。
8、 所用电泳条件不合适,可以将电泳时电压不应超过20V/cm,温度<30℃,巨大DNA链,温度应 <15℃,核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力。
9、 DNA样含盐过高,可以在电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐。
10、 有蛋白污染,可以采用电泳前酚抽提去除蛋白。
11、 DNA变性,电泳前勿加热,用20mM NaCl缓冲液稀释DNA