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磁珠法核酸DNA提取里常用的磁珠有羧基和羟基磁珠,两个有什么区别吗?用羧基磁珠进行核酸提取效果好还是羟基磁珠核酸提取效果好?二者有什么区别?
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羟基磁珠表面修饰大量的硅烷醇基团(羟基),能在高盐低pH条件下和溶液中的核酸通过疏水作用、氢键作用和静电作用等发生特异性结合,而不与其他杂质(如蛋白)结合。
羧基磁珠具有超顺磁性、快速磁响应性、高羧基含量、单分散性和亚微米尺度粒径等特点,能够在特殊化学试剂(如EDC)的作用下将多肽、蛋白、寡聚核苷酸等生物配体共价偶联到微球表面。
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多亏你问这个问题,我才能学到:
常用核酸提取结合液,PuriMag Si-OH磁珠和PuriMag Si-COOH均能对核酸有效吸附。一般来说,在离液盐体系,PuriMag Si-OH磁珠对核酸吸附效果相对较优;在PEG体系,PuriMag Si-COOH对DNA和RNA吸附效果相对较好。不同尺寸磁珠,悬浮差异明显,尺寸越小悬浮性越好,但磁响应会减弱。一般用于核酸含量较低的小样本,选用悬浮性好的磁珠效果更优。
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两者之间的不同点:
1.结构上的不同点:在壳层结构中的功能基层所含的官能团不一样,氨基 磁珠富含的是氨基(-NH2),羧基磁珠富含的是羧基(-COOH)
2.功能上的不同点:由于富含的功能基团不一样,所以使用的环境和机理 也不一样,氨基带有负电性,显碱性,在碱性溶液里能够稳定存在,羧
基显酸性,在酸性溶液里能够稳定存在。在与蛋白质偶联时,所使用的有机试剂也不一样。
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