请问单细胞测序技术，用流式细胞术挑选完免疫细胞后，为什么再进行聚类，有的免疫细胞又被划分成其他种类的免疫细胞了。

在进行流式细胞术的数据分析时，圈门的方式和逻辑体现了我们对数据把控的准确性，以及对客观数据的理解性。所以建议在数据分析前一定要自己去搞清楚指标和指标的关系，再来按照一定的逻辑进行圈门才会获得比较客观严谨的结果。首先我们要知道，通常展示的结果大部分的时候都只是流式结果的一小部分，比如我们对一个细胞进行双染，流式的结果信息就有4个，即这群细胞双染的双阳群1个，双阴群1个，单阳群2个；那3染呢？即三阳1个，三阴1个，双阳3个，单阳3个，共计8个；总的来说流式获得的亚群数其实就是2的n次方了，n=抗体数。如此一来，其实我们一个18色的染色panel，但是实际上信息量应该是2的18次方=262144 Plots，所以很多时候我们只是把我们想展示的结果展示出来，如同主观的盲人摸象。想要让主观的盲人摸象变得那么客观一些，我们能做的就是严谨的按照逻辑思路去进行数据的圈门分析，这样结果才会让人信服。聚类的目的就在于此。