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免疫组织化学图像处理预热篇——图像分析原理及过程 懂原理更精通

图像分析基本原理及分析过程概述在生物及医学研究中,对图像的判读与分析特别是对显微镜下微观图像的观察研究从来都是重要的研究手段。随着技术的进步,分析图像的方法也从眼观尺量进入到了使用计算机软件进行定量分析的阶段。计算机软件的发展速度呈加速前进,采集图像的设备也不断更新,这使得我们能有更多的手段来分析测量复杂的生物图像。现在我们可以使用CCD数码相机来采集图像。使用功能比较强大的图像分析软件来进行图像分析测量 ...

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淋巴细胞的采集、培养心得技巧

第一就是要稀释。我们要留血浆(肝素钠抗凝的采血管采的血,5~6ml),所以分离、取出血浆后加入和红细胞等体积的生理盐水,一般3ml左右,混匀。第二,分离液不在乎体积有多少,主要是高度,如果离心管很粗的话(呵呵,挺吃亏的),就要多加一些,细一点的离心管就可以少加一些,一般高度要超过3cm。第三,看你要分离的血是什么来源的,成人外周血比较好分,脐血和胎盘血不好分。当然,发生溶血和凝血的话就更难分了。第四,血的保存很重要,采血后不 ...

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采用Empower 3 ICH杂质处理简化药物产品中杂质的分析

展示采用Empower® 3 ICH杂质处理,通过定义允许阈值限制以及快速鉴定超出限值的结果,简化盐酸齐拉西酮中杂质的分析。

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Discovery Studio在化合物反向找靶领域的解决方案

药物潜在靶标的识别对于早期药物分子的研发、安全性评价和老药新用等领域都有着非常重要的意义,但是受制于通量、精度和费用的影响,实验手段的应用难以广泛开展。作为一种快速而低成本的手段,计算机辅助的靶标识别算法的开发正在受到越来越多的重视,发展快速、精确的靶标识别预测方法对于靶向性药物开发、药物-靶标相互作用网络图谱的构建和小分子调控网络的分析都具有十分重要的意义。目前,通过计算机辅助进行反向找靶主要有三种方法:反 ...

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单细胞miRNA表达谱

miRNA 是一类22 碱基左右的非编码RNA,能够被整合到沉默复合体(RISC)中,使碱基互补的目标mRNA 沉默或降解,以实现其调控作用,与生物正常的生长发育以及各种疾病如癌症和心血管疾病等的发生都有着密切的关系。单细胞miRNA表达解决方案 启因生物独家引进美国NanoString公司的多基因表达 计数系统nCounter assay system,它仅需100 ng的RNA即可对逾八百个特异的mRNA转录子进行准确的定量;它无 需酶 ...

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基因枪在无菌操作台中的使用

设备和材料GDS-80 基因枪配口径 4.5 mm的枪管,压力调节器和软管(WGB09O001)(Wealtec)无菌操作台3 cm目标间隔件(Wealtec)纯度 99.999%氦气样本:玉米胚芽(Zea maysL. embryo.)实验步骤1. 调整 GDS-80基因枪输出压力设置,并在实验前按说明书中指示调节设定,确保轰击喷射均匀。注意,调节均匀喷射条件之后,需使用 70%乙醇清洗加样套管及枪管。2.操作前需对无菌操作台进行清洁和消毒处理工作。(至少紫外线 ...

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1个月亲身经历动物实验总结的之尾静脉注射心得!

我做的实验是关于肿瘤的,其中一部分内容就是关于皮下成瘤和尾静脉注射肿瘤细胞看肿瘤肺转移成瘤情况,分为实验组(下调某基因)和对照组(空质粒)!其他的方面我先咱不谈,先谈谈关于尾静脉注射的经验和心得吧,希望能对对此实验困惑的同志以帮助吧!我们实验都是拿裸鼠做的,预实验是我扎了一只,打了4-5 针一针都没进,后来让我们科的一个护士来扎都扎不进去!并且让人倍感压力的是实验组和对照组要对比,所以要求打进的肿瘤细胞量得一致!小老 ...

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ELISA的原理和类型(一)

ELISA的原理和类型1. ELISA的原理ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上 ...

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采用Empower样品组生成器自动创建色谱方法进行方法验证

目的展示采用Empower®3软件的样品组生成器自动创建色谱方法和样品组方法,并将其用于验证盐酸甲氧氯普胺及其有关物质的UPLC®方法。背景分析方法的验证过程非常复杂且要求严苛,包含许多费时的步骤。一些验证步骤涉及数据的采集、审查和处理,以及验证结果的计算、批准和最终报告。其中的一项关键任务是稳定性测试,该测试研究色谱参数中的细微改变对方法性能的影响,从而确定耐受限值。为了进行每个验证测试的数据采集,必须精心设 ...

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DNA电泳常见问题分析

DNA电泳的MARKER怎么是扭曲的?1、 配制胶时的缓冲液需要和电泳缓冲液不是同时配制的.最好是同时配制.电泳时缓冲液高过液面1-2mm即可。2、 电泳时电压过高,可以在电泳前15分钟用较低电压(3V/cm),等条带出孔后比较漂亮了.然后再调电压。3、 上样时尽量慢慢加样,等样品自然沉降后再加电压。跑出的DNA带模糊?1、DNA降解:避免核酸酶污染。2、 电泳缓冲液陈旧:电泳缓冲液多次使用后,离子强度降低,pH值上升,缓冲能力减弱,从而 ...

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基因组DNA文库构建必备实验技巧

基因组DNA文库用途十分广泛,如用于人类及动植物基因组学研究,基因表达调控研究,分析、分离特定的基因片段等。通常情况下,基因组文库构建的基本流程可以归为四大步骤:分离基因组DNA、对基因组DNA作相关的处理、将基因组DNA片段连接入载体、将重组载体转入宿主细胞。一、分离基因组DNA(gDNA) 毫无疑问,高质量的。二、基因组DNA对于基因组文库构建是至关重要的。需要通过经验来选择合适的基因组DNA 分离方法,在分离 过程中保证 ...

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免疫组化常见问题的处理

当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色① 确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。② 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。③ 对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体,以及所用的检测系统是否和一抗匹配,这一点是非常重要的。比如,如果一抗是兔来源的抗体,二抗一定要用抗兔的二抗来匹配;或一抗是小鼠的IgM一抗,二抗必须是山羊/兔抗 ...

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ELISA检测结果准确可靠的必要条件

优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试剂均与特殊仪器配合应用,严格遵照规定操作,必能得出准确的结果。可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗 ...

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PCR芯片技术操作流程

1.PCR芯片介绍实时定量PCR是检测基因表达最灵敏、最可靠的方法。通过在试验过程中,实时监测荧光染料的信号变化可反映出样品中的基因拷贝数,并且实时定量PCR线性范围广(能达到5个数量级),因此可以检测同一样品中表达量极低的基因和表达量很高的基因。但是,由于实时定量PCR需要制备标准曲线和同时分析内参基因,因而每次实验只能检测少数几个基因的表达水平,若要检测大量基因,则工作量巨大,耗时长久。通过简单的以及经过优 ...

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用于给药系统的脂质体表征

马尔文仪器公司的高级应用科学家Pauline Carnell和技术支持经理Mike Kazsuba探讨了纳米颗粒跟踪分析技术以及光散射技术在表征脂质体作为药物载体中的应用及效果。脂质体是一种重要的给药载体,已获批用于多种治疗配方。脂质体由磷脂质组成,具有单层或多层结构,拥有亲水内层和疏水外层,可制成不同大小的颗粒。这些颗粒可进行生物降解,基本无毒。最为重要的是,它既能封装亲水物质,又能封装疏水物质。此外,通过修饰脂质 ...

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研发领域信息化解决方案

随着大数据时代的到来,医药、材料、化工等行业的研发领域在产品生命周期管理所面临的提高创新能力,提升效率降低成本,加强风险控制方面的压力和问题越来越多,亟待信息化的解决方案。从研发项目的管理,研发数据的管理,实验室信息化管理,科研工作保障相关的试剂、仪器等的管理等方方面面,如何建立健全信息化平台,走可持续发展信息化之路?这些问题是国内研发企业迫切希望了解和借鉴的。制药领域研发信息化综合解决方案目前大多数研发企业或 ...

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基因枪在植物应用方面的多样性

引言 依靠航空气体动力学原理设计的枪筒,GDS-80能够以非常低的气体压力进行微粒加速基因传递。 凭借先进的加速原理,在性能方面GDS-80低于80 psi的气压设置,与传统基因传递系统中需要数百甚至上千psi气压设置的传递效果相当,甚至更优。此外,GDS-80便携式的外形可以很容易地搭配各种配件并应用在不同的样品上。本文中将展示出一些典型植物样本,通过GDS-80进行的基因转染的实验效果。针对不同的样本特性,文中相对应地 ...

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【生物美学入门课程】如何快速简单地绘制论文插图

科研和医学研究工作者们在论文发表,科研成果展示中往往需要若干张涵领总意的插图,而生物医学领域从业人员通常对于平面设计软件所知甚微,那么精美插图对于科研、医学工作者来说,无疑是一道很难逾越的鸿沟。在国外学术交流、研究成果交流会议中,国外学者往往用若干张简洁精美的插图便能清晰地展示内容,国际知名期刊也越发要求投稿文章需要配上插图的大环境下,难道就没有一些简单而富有成效的方法帮助解决如此难题吗?今天,我们利用一款平 ...

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做ChIP需注意 心得体会来帮你

做ChIP(Chromatin Immunoprecipitation)几个月,时间不长,但深刻体会细节决定成败,把自己认为值得注意的细节总结如下:1、cell counting:尽量做到准确,会影响input结果。2、cross link:甲醛的终浓度是1%,这个基本所有的protocol上都会强调。3、resuspend cells with SDS:一定要选用小的tip头,在液面下吹打,否则很容易产生气泡,后面的sonication就 ...

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荧光定量PCR详细流程和问题解析(五)

其他方法也可以采用类拟的策略,以节约成本,提高效率。反应体系的建立及优化1. SG浓度:终浓度1:5,000-1:100,000,一般为1:10,000-1:70,0002. Primer浓度:终浓度50nM-300nM固定摸板浓度的梯度实验不加摸板的对照实验(NTC)--有无非特异信号熔解曲线的分析--是否单峰建议使用HPLC纯化的引物3. MgCl2浓度降低MgCl2浓度以减少非特异性产物最低可至1.5nM同时做梯度实验和NTC对 ...

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