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血尿的发病机制及尿红细胞形态的临床意义

机制与蛋白尿几乎都来源于肾脏不同,血尿可来源于泌尿道的任何部位。导致血尿的病因多种多样,绝大多数由泌尿系统疾病引起,但也有少数是由全身性疾病如凝血功能障碍等导致。外科性血尿多表现为肉眼血尿,常伴有血丝或血块,主要由泌尿系统结石、肿瘤及创伤引起。而内科性血尿常表现为镜下血尿或肉眼血尿,主要由原发性或继发性肾小球肾炎、遗传性肾炎、各种原因导致的泌尿系统感染、结核及多囊肾等导致。剧烈运动也可导致血尿。需要注意的是不同 ...

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冰冻切片实验技巧(二) 组织块

组织块的准备1.调整好组织与刀片的方向这是冰冻切片准备中极为重要的方面,使用一些包埋物可以使这项工作变得简单,在我的工作中我总结出一些经验可供参考。a.脂肪放在最后切。脂肪由于硬度不够,对绝大多数组织均合适的温度却切不好脂肪组织,如果一刀下去,组织中的脂肪先接触刀片,就会破碎并使整个片子损坏。如果脂肪最后接触刀片,则切片过程不受干扰。最糟糕的情况是脂肪部分先接触刀片而没有包埋物的保护,包埋物可以给片子提供一个起 ...

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SDS-PAGE失败实例及分析第四期—— 条带仅在凝胶顶部

接上一期 SDS-PAGE失败实例及分析 前端指示剂缺失,本期就来讲讲由于条带仅在凝胶顶部,而在产生的问题过早终止电泳——例1很明显这块胶的指示剂前端位于什么位置。仍有继续电泳的空间可以把条带分得更开以增加分辨率。相对迁移率是为了分析凝胶相同位置上相同大小的蛋白。随着蛋白迁移距离的增加分辨率逐渐增高直到弥散限制了分辨率的继续提高。过早终止电泳——例2这两块胶一个是7%的一个是14%的,看起来都还不错。有些人做实验室很不 ...

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掌握这几点毕业论文综述轻松搞定

正文1.如何提高中文论文的阅读效率(前提:已找到相关中文文献+先阅读中文文献后阅读英文文献)?a.在阅读开始前先“打开”并“保存”一个Word文档,并且通过“工具”中的“自定义工具栏”将其中的“替换”拖到工具栏(这样有利于养成良好的“流程”习惯,可以大幅度提高后续的查找、文献再阅读、文献应用等工作,而且也便于以下的“复制”工作进行);b.快速概览文献,并且注意所读文献的题目、摘要、关键字(尤其是中文文献的英文关键字,它可以成为你查 ...

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斑马鱼快速检测类过敏反应方法的建立及其应用

中药注射剂和药用辅料引起的类过敏反应已经成为药物质量控制中遇到的一个严重问题,但目前的还缺乏能够快速、准确、可靠地大规模进行类过敏反应检测的方法。体外实验虽然快速、高效,但是检测结果的预测准确性不高;哺乳动物实验跟人体的实验结果相关性较好,但是很多观察指标无法定量,只能定性观察,实验操作人员个人技术水平和经验等主管因素会对实验结果产生干扰。本研究利用斑马鱼,建立一种体内类过敏快速检测模型,并利用此模型,检测药用 ...

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诺如病毒的实验室检查

诺如病毒是一组杯状病毒科的病毒,以前也称之为“诺瓦克样病毒”。诺如病毒感染影响胃和肠道,引起胃肠炎或“胃肠流感”。“胃肠流感”不同于流感病毒引起呼吸道疾病的流感。 诺如病毒感染性腹泻是由诺如病毒属病毒引起的腹泻,具有发病急、传播速度快、涉及范围广等特点,是引起非细菌性腹泻暴发的主要病因。诺如病毒感染性强,以肠道传播为主,可通过污染的水源、食物、物品、空气等传播,常在社区、学校、餐馆、医院、托儿所、孤老院及军队等处引起集体暴发。 诺如 ...

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染色质免疫共沉淀CHIP 超声问题集锦

本文摘自丁香园论坛:http://www.dxy.cn/bbs/thread/21866348#21866348问题:最近要做CHIP,有一点疑惑:如果超声过程正好把目的基因断开,PCR时应该就检测不到目的基因了啊!有这样的情况吗?解答:1. 超声要摸条件,使DNA 片段大都控制在300-500bp(其实200-800bp也可以的),太小了基本都打断了,没法PCR。2. 设计PCR引物时,产物的长度不要太长100多就可以,产物太长不容易 ...

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染色质免疫共沉淀超声破碎时间摸索

问题:各位大虾,大家有没有做这个的啊?我是个新手,想向各位请教一下超声波破碎的条件摸索,从哪几个方面入手,因为它要求片断要破碎到200-1000bp,我怎么破都在200-1500左右,请不吝赐教!回答:1、固定超声的功率,调个中等的,然后摸时间,这个比较简单可以从1min开始摸起,然后步长1min,步长指的是:比如从1分钟开始,步长为0.5分钟,那么就会有如下的组,1 1.5 2 2.5 3....分钟

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免疫共沉淀实验抗体的选择

小弟是新手,刚开始做实验,向诸位请教一个问题。我要做一个蛋白的 IP,520个AA,58/55kDa,查文献都是用标签FLAG的抗体做的,但现在没有这个标签的真核表达载体,想直接转染后用目的蛋白的抗体做,不知 道可不可以?还有就是,什么时候用标签,什么时候可以不用?标签的选择有没有要求?请大家不吝指教,*!ps:小弟新虫,金币不多,大家见谅啊!问题:看的文献上都是用含标签的目的蛋白基因的载体转染细胞,然后做IP,我想,是不是目的 ...

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自然染色质免疫沉淀实验设计(Native Chromatin Immunoprecipitation (N-ChIP))

1. The preparation of native chromatin from cultured human cells1.1.Cultured cells (e.g. HL-60 or lymphoblastoids) are grown to a density of approximately 1 x 106 cells/ml until they are inlog phase.1.2.Harvest cells: centrifuge samples (7,000 g, 10 min, 4°C) and wash the cell pellet 3 x ice cold PBS (Pho ...

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交联染色质免疫共沉淀(X-ChIP)实验设计

ChIP是一种强大的确定蛋白或者组蛋白修饰在基因组上定位的实验方法。染色质被分离出来后采用抗体与抗原的结合来判定目的蛋白是否结合在特定的DNA序列上或者判定目的蛋白结合位点在全基因组范围的分布(微阵列或DNA序列)。这种方法具有空间性与时效性。该实验设计为如何在细胞中进行ChIP实验提供了详细的步骤。1. 交联和细胞收获甲醛可以将蛋白质交联到DNA上。交联结果的好坏决定于交联时间的把握。我们建议样品交联的时间 ...

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体内甲醛交联及染色质免疫沉淀--研究DNA和蛋白质作用的新方法

染色质由真核基因组包装而成,它参与了转录、复制、重组、修复等许多以DNA一蛋白质相互作用为基础的生化过程。研究者感兴趣的是这些过程涉及到哪些特异的基因或DNA序列,有哪些蛋白质参与。尽管有许多人对染色质进行分类,就像Holde将其分为转录活性或非活性位点,但染色质构本身是动态的,并且DNA与非组蛋白相互作用常是瞬时的。因此极有必要发展一种方法,能够研究生理状态下DNA与蛋白质的结合,避免DNA结合蛋白在染色质 ...

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您会计算血培养污染率吗?

来源:王云峰 Emory University, GradyMemorial Hospital 翻译:王 启 北京大学人民医院 计数每月接收的独立血培养套数(1个静脉穿刺点取的血培养计算为1套),1个患者可以有1套或多套血培养。计数血培养生长痤疮丙酸杆菌、芽孢杆菌、微球菌或凝固酶阴性的葡萄球菌的套数。这些细菌都可能是“污染菌”。芽孢杆菌和微球菌“一直”都属“污染菌”,痤疮丙酸杆菌“通常”都是“污染菌”,而凝固酶阴性葡萄球菌则可能为“污染菌”或导管相关性 ...

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ELISA测定错误结果的原因分析

ELISA即酶联吸附试验,是一种常用的固相酶免疫测定方法。Engvall 和Perlmann于1971年最先应用该法进行了IgG定量测定,并命名为"enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)"。 ELISA的基本原理是:①使抗原(或抗体)结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性;②使抗原(或抗体)与某种酶联结成酶标 抗原(或抗体),而且此酶标抗原(或抗体)既保留其免疫活性,又保留其酶活性;③测定时将受检标本( ...

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采集标本对凝血四项分析的注意事项

凝血酶原时间(PT)活分部分凝血活酶时间(APTT)纤维蛋白原(FIB)及凝血酶时间(TT)测定常用血栓与止血筛实,在临床上常用于病人手术前准备,抗凝剂用量的观察,出血性的疾病或血栓性疾病的初步诊断和疗效评估,是判断机体出血和凝血系统病理变化,手术前筛查凝血系临床药物冶疗和重要指标,但影响实结果的因素较多。因此,实的标准化是测结果的保证,因各实室或同一实不同方法测定都存在着差异。为了得到准确和可靠的实数据。测过程中 ...

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大鼠胰腺的精准解剖实验心得

在大鼠腹部正中行纵行切口,2-3cm即可。胰腺是散在的,不是一个完整的器官。在胃,肝脏,小肠之间,如下图所示的淡黄色偏白的组织,你只能一点一点把 它取下来,注意和脂肪细胞区别,脂肪细胞和它很像,但是仔细看,胰腺每个小团块都有分叶,就是和胰腺病理一样的花纹,但是,脂肪细胞就没有,而是一团淡白色的组织。进针的地方就是这张图我用箭头指向的那个点。有个找位置的窍门,轻轻捏起十二指肠,展开胰腺,对着灯光,隐约可以看到有一条细细的透明 ...

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共聚交显微镜相关程序安装及操作(二)

接上一期《共聚交显微镜相关程序安装及操作(一)》,本期继续讨论《共聚交显微镜相关程序安装及操作》,主要内容涉及背景校正,对比度和强度的调整,添加标尺和其他标记等。背景校正olympus FV1000提供了三种背景校正方式:第一种:是选定一个ROI(region of interest)以后,以ROI的荧光平均值作为背景,然后软件会自动减去背景。第二种:是选择一张没有阳性表达的部位作为背景图片,然后进行扣除,第三种:是--我也忘记了。 ...

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中国急诊医师协会:特殊情况紧急输血专家共识

起草小组:于学忠,郭树彬,杜铁宽,白连军,王仲,张茂通讯作者:郭树彬(北京协和医院急诊科)(中国急救医学 2013, 33(6))为挽救生命、积极救治患者,在受到客观条件限制常规抢救治疗措施无法实施,法律尚无明确规定的特殊情况下,允许医生为挽救患者生命按照下列步骤采取紧急输血措施。1 血型不明时紧急输注O型红细胞处理流程1.1适用情况患者必须同时满足以下所有条件方可启动此流程:1.1.1 ABO血型难以确定(如:ABO血型系统的亚型表型, ...

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呼吸道感染快速床旁诊断的进展和前景

2014 年 11月,Lancet Infect Dis上发表了“新出现的呼吸道感染”系列文章,共5 篇,其中第4篇主要描述了现有的呼吸道感染病毒和细菌病原体的诊断试验,以及有望提高床旁快速诊断质量、速度和可操作性的技术发展。现将主要内容编译归纳如下。呼吸道感染由多种病毒和细菌病原体引起,是全球发病和死亡的第二大常见病因。在全球疾病负担的排名中,下呼吸道感染仅次于缺血性心脏病位居第二。欧洲的监测报告显示,由耐药细菌所致的感染数量显 ...

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DNA SMART技术让ChIPSeq研究更轻松

Clontech是cDNA合成技术的引领者,近年来SMART(Switching Mechanism at 5’ End of RNA Template)技术被公认为是微量RNA和单细胞RNA-seq的行业金标准。现在创新的DNA SMART技术将模板转换机制的优势拓展到了DNA分析,利用DNA SMART ChIP-Seq Kit无需接头连接即可构建ChIP测序文库,极大地缩短了实验进程。科学技术的发展有时需要突破实验技术的挑战,如何从染色质免疫共 ...

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