nafgnaw 想做Notch信号通道,RNA干扰较麻烦，想用通道阻滞剂来代替。如γ-分泌酶，NICD拮抗剂等。最好是特异性较好的，能直接阻断或降解NICD.有人做过这方面的没，望希望指点一下啊。谢~~nafgnaw 算了，还得靠自己。chuckdouble gamma-secretase inhibitor, DAPTzhanghaopeng 请问一般的给药浓度是多少啊？谢谢！rendangli DAPT在体外的应用浓度从50 nM至50µM 不等 ...

wanghaoxun 各位高手们：我想问一下炎性因子如IL-1,IL-6的JAK/STAT转导通路是什么样的？这些因子是主要是作用于那个JAK和STAT分子？最终STAT作用的靶基因有哪些？非常谢谢了！另外，有没有前炎性因子和抗炎因子的JAK/STAT通路图？summityoung LPS,IL-1刺激细胞产生NF-kb通路，受NF-KB调控的基因有IL-1，IL-6，TNF等。LPS，POLY I C等刺激细胞会产生IFN，IFN再刺 ...

summityoung 那位学长有ISRE质粒，谢谢。我有多种质粒可以交换zfv2007 Do you have any lentivirus plasmid?zhujoker 我有，就是具有IRES启动子的质粒吗？本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

tanbo110 1：Mda-7/IL-24基因是不是就是MDA-7翻译后得IL-24蛋白啊？2：MDA-D-74基因我查了GENBANK为什么查不到呢？HUMO的我看了最近看了篇 Cloning and characterization of SARI (suppressor of AP-1, Regulated by IFN).的问题hanyanyan1015 我也查不到，到底能不能查到啊。freecell The melanoma differentiation-asso ...

dyqin PD98059和SB203580怎么溶解？谢谢啊doctormy 两个试剂均可用DMSO或甲醇溶解，但通常用DMSO。PD98059在DMSO中的溶解度为:6.5 mg/mL具体的溶解换算比例如下：1.5mg溶于280ulDMSO------------母液浓度为20mM/L1.5mg溶于112ulDMSO------------母液浓度为50mM/LSB203580在DMSO中的溶解度为: 50 mg/mL分子量为377.4，具体换算比例自 ...

xueruo 你好，本人要做IKK-NF-κB通路方面的研究，做的是胃上皮细胞，指导导师让我用NBD抑制IKK活性，并要求我订购IKKβ磷酸化抗体做IKK活性试验，我有点困惑，查了不少的文献，IKK都是引起IκB磷酸化激活NF-κB的，而非IKK磷酸化激活的，其中的原理是什么?NBD多肽我在文献上看到有野生型，突变型，好多文献里NBD多肽是找公司合成的，肽链有长有短，打电话问公司订，他们要求我提供序列，我也不知道提供什么 ...

ydj19830 Nature：阿尔茨海默病发病机制研究专题：Nature报道美国加州Genentech公司研发部和Salk研究院分子神经生物学实验室的研究人员在大脑神经连接发育研究项目上取得最新的进展。相关成果公布最新的Nature在线版上，文章揭示了神经连接发育的机制，其中Caspase在其中发挥重要作用。在大脑的神经连接发育过程中，自然地会发生轴突分支与神经元凋亡的事件，这些事件有助神经连接发育，然而，为 ...

sunyong_97 我先简单汇报一下实验内容：我想研究某一刺激因素上调粘蛋白的信号通路，准确的说就是找到哪一条即可，不需要深入研究。我的思路如下：1，加入刺激因素后，让rt－pcr和wb证明粘蛋白表达增加。2，文献检索得知，粘蛋白主要有3条通路3，加入刺激因素后，分别检测3条通路中标志蛋白是否升高，升高的即可能 为通路；然后在这条可能的通路中加阻断剂，看是否阻断；这样即可找到通路。4，或者，第三条不要，直接到4，加入刺激因素后 ...

feroger 请问在平滑肌细胞增殖信号通路中，NF-KB、EKR、PI3K三条通路是并列的吗？还是NF-KB是EKR、PI3K其中一个的下游信号通路？谢谢yhwangcams 这个问题？有点......还是多看看文献，建议先看综述。feroger 我就是看了文献后才糊涂的，有的说3条并列，有的说NF-KB是EKR的下游靶点，更多的说NF-KB是PI3K的下游靶点。刚刚接触这方面的信号通路，望多指教，谢谢！yhwangcams 呵呵，好多 ...

nulidaodi 我做的课题需要用脂多糖来激活MAPK通路，并且分别在激活5m，10m，15m，30m，60m后检测，加入脂多糖的时候应该是在无菌操作台中操作，因为外面空气中有细菌，也就是说有脂多糖，会影响实验结果，在加入脂多糖后，时间点到了，比如说已经到了5m或10m，这时候该如何终止反应呢？用生理盐水清洗然后加入细胞裂解液裂解细胞，是这样地吗？那么这个过程在什么环境中操作呢?如果加入脂多糖到了时间点后就把培养皿 ...

hmucn 请问AICAR用什么溶解还能保持其活性，我试用水溶可是不能溶解，用DMSO能够溶解可是又影响其活性。另外，请教hypoxanthine是不是也只能用DMSO溶解，可是再用xanthine oxidase反应预使其产生超氧，可是有时就没有效果，请问有谁能够帮助提供二者反映的最佳条件吗？谢谢了！！！doctormy AICAR应该现用现配，其在水中的溶解度大约为7 mg/mL。你可能配的浓度太大了。至于hypoxant ...

真水无香2009 Notch信号在诱导干细胞分化NK细胞中的作用，是最近工作中比较急需的。相关文献好像并不多，而且有的文献并不提供全文，有没有这方面的达人可以提供些相关文献或相关知识？先谢了。真水无香2009 MS没人理。郁闷ing。。。。。。莘橙 我也想知道Notch信号与干细胞之间的关系，但主要是心脏方面的本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：sh ...

tuyuan 我马上改开题了，老板让做家蝇信号通路，就是模仿果蝇的方法做toll通路。但很难找到特异性抑制剂，想在蛋白和基因两方面看通路阻断或诱导前后蛋白等变化，希望高手指点指点。不甚感谢！xxg216 你好：我们是做TOLL通路的 ，也是准备阻断这个受体，观察一些变化的，可以使用中和抗体将其阻断，人，小鼠的比较好找，美国eBioscienc公司就有，我们使用大鼠的，寻找了好久才找到，是ABCAM公司的TLR4 antibody - A ...

dcz200210021 想向大虾们请教几个问题,现在抑制NF-κB活性的方法有哪些种？ 都各有什么优缺点。有没有些关于这方面的文章可以介绍给我看看。不甚感谢！doctormy 常见的方法有：1、RNAi（NF-κB p65 siRNA）：优点特异性较强、缺点价格较高2、针对NF-kB亚基设计的反义寡核苷酸（如NF-κB p65反义寡核苷酸）：优点，靶点明确；缺点，抑制效率不如RNAi3、转染IkB-a突变体阻断NF-kB活化：优点，靶点明确；缺点 ...

8218lijing 如题：请教各位ROS自身的信号通路。想要阻断其信号通路，有什么试剂？谢谢诸位！8218lijing 有做这方面的战友吗？doctormy 主要研究过ROS与凋亡的关系（如下图）阻断试剂中最常用的是NAC、catalase。应用NAC预处理即可在一定程度上清除刺激因素导致的细胞生成的ROS理论上，在培养中加入catalase即可降低ROS水平。8218lijing 非常感谢！要清除培养上清中的ROS用什么 ...

ilzmx 我的方法是将人正常肝细胞(买的细胞株)在六孔板内的盖玻片上，待长满融合后，在六孔板内操作，用PBS洗三次，加0.05% lucifer yellow染料1ML,然后用手术刀片在玻片上划痕,放回培养箱内孵育5-8分钟(3分钟也试过),然后PBS洗2-3次,取出盖玻片在荧光显微镜下观察,细胞未经任何处理,染料传输情况很不理想,我在文献中查到正常细胞应该能传到离划痕4-5层才对,为什么我的做出来没有传输,图我贴上来了,不知是 ...

yinshine STAT3的细胞定位，及与氧化应激、凋亡的关系是什么啊，望各位指点，越详细越好；还有啊，Ref-1具体是什么东西啊，定位哪里，它与氧化应激、凋亡的关系是什么呢。谢谢doctormy 回答你的第一个问题：STAT3通常被认定为是促进组织细胞抗凋亡效应的，因此，较多研究将其视为肿瘤治疗的靶点之一。氧化应激通常会激活STAT3信号通路，从而导致抗凋亡效应，进而发挥保护组织细胞的效应。关于STAT3的细胞定位，见 ...

heroflower 我现在有一个启动子区的序列，已经分析了可能结合的转录因子，现在想看看这个转录因子中哪些是一个激酶的下游底物。也就是说这个激酶可以调节哪些转录因子，有什么办法嘛？谢谢heroflower 没人知道嘛？doge 这个网站应该可以满足你的要求http://www.ebi.ac.uk/thornton-srv/databases/cgi-bin/CSA/CSA_Site_Wrapper.pldoge sorry ，上面的帖子 ...

清茶小狗 信号通路和信号转导有区别吗?谢谢!时光转角处 没区别wy063000 略有差别，信号转导包括配体-膜受体-信号通路-核受体-蛋白一系列事件zhangtx08 没什么区别吧本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

莲芯 请各位高人指点，在RhoA-ROCK信号通路中，如何用实验解析RhoA是怎么活化的呢,并且ROCk是如何参与细胞运动的．十分感谢！急呀！dianaofyezi 可以购买相应的试剂盒进行检测活化后的RHO-A蛋白。doctormy "如何用实验解析RhoA是怎么活化的呢"，如果我没理解错的话，你的意思是解释和分析，这是试验设计的基本问题，只有结合你的课题具体思路去设计解释。关于ROCk是如何参与细胞运动的，相关文章太多了 ...