【求助】检测细胞间隙连接,划痕染料示踪实验问题！！！

我的方法是将人正常肝细胞(买的细胞株)在六孔板内的盖玻片上，待长满融合后，在六孔板内操作，用PBS洗三次，加0.05% lucifer yellow染料1ML,然后用手术刀片在玻片上划痕,放回培养箱内孵育5-8分钟(3分钟也试过),然后PBS洗2-3次,取出盖玻片在荧光显微镜下观察,细胞未经任何处理,染料传输情况很不理想,我在文献中查到正常细胞应该能传到离划痕4-5层才对,为什么我的做出来没有传输,图我贴上来了,不知是什么问题!!后来我用小鼠原代皮肤成纤维细胞染色，效果仍然如此，

这是我用小鼠成纤维细胞染色的照片

我曾经做过大鼠肺2型细胞，效果还可以，至少能传递3层。当时用的是荧光素钠，好像分子量比荧光素还要小。是不是分子量小，穿透力就强啊（我很久没碰实验了，也许是错的）

谢谢楼上，文献中我没查到用荧光素钠的，实验还是没有进展，还有人做过这个实验吗，

人正常肝细胞的几种cx蛋白检测过没有?这个主要还是研究缝隙连接蛋白的功能的!

人正常肝细胞的几种cx蛋白检测过没有?这个主要还是研究缝隙连接蛋白的功能的!

没有检测，但原代成纤维细胞有文献报道是存在间隙连接的。目前实验仍停止，有没有人做过这个实验，我可以前去学习学习。

请问最后你做出来了吗？我用了荧光黄锂盐染料，同样没做出来，求指教！